一、先別急著換設(shè)備，看看你的液相還能多快

很多實(shí)驗(yàn)室手里都有HPLC，也沒壞，就是慢。

一個(gè)樣品跑二三十分鐘，一天撐死四五十針。遇到方法開發(fā)、雜質(zhì)追蹤、工藝驗(yàn)證扎堆的時(shí)候，儀器連軸轉(zhuǎn)，人還得跟著倒班。

這時(shí)候有人跟你說，換個(gè)“超快速液相”吧。

但你心里嘀咕：不就是加壓?jiǎn)?？我現(xiàn)在的泵也能加壓。真有那么大差別？

差別不在“能不能加壓”，而在整套系統(tǒng)是不是為“快”設(shè)計(jì)的。

二、什么是超快速液相色譜儀

超快速液相色譜儀，不是一臺(tái)泵換了個(gè)名字。

它是一個(gè)從輸液、進(jìn)樣、分離到檢測(cè)，全流程為縮短分析時(shí)間而優(yōu)化的系統(tǒng)。

以依利特超快速液相為例，它的泵可以在更高流速下保持極低脈動(dòng)，進(jìn)樣器能在1秒內(nèi)完成定量環(huán)填充，檢測(cè)器采集頻率翻倍，連管路內(nèi)徑都專門縮徑——為的就是不讓任何環(huán)節(jié)拖后腿。

你換一臺(tái)普通HPLC，把流速硬拉上去，結(jié)果是壓力飆高、柱效下降、基線飄移。

超快速液相不是硬來，是每一步都踩在點(diǎn)上。

表1. 常規(guī)HPLC vs 超快速液相色譜儀 核心對(duì)比

三、它到底是怎么快的

原理說穿了不玄乎。

第一，用小顆粒。

常規(guī)HPLC用5μm填料，超快速液相用亞2μm（1.8μm、3μm）。顆粒越小，傳質(zhì)路徑越短，峰越窄，分離越快。

第二，用短柱。

柱長(zhǎng)從250mm縮到50mm、100mm。同樣流速下，分析時(shí)間直接砍半。

第三，系統(tǒng)體積小。

從混合器到進(jìn)樣閥到檢測(cè)池，死體積壓到低。峰不會(huì)在管路里被展寬，快跑也不會(huì)拖尾。

第四，檢測(cè)器跟得上。

普通檢測(cè)器一秒采集10個(gè)點(diǎn)，超快檢測(cè)器一秒采集80、100個(gè)點(diǎn)。峰再窄也能描圓，不會(huì)漏峰。

這些加在一起，一根原本跑30分鐘的樣品，現(xiàn)在8~10分鐘出結(jié)果，分離度還不掉。

表2. 超快速液相的四大核心原理

四、它適合做什么

不是所有樣品都需要超快速液相。

但下面這幾類，用常規(guī)HPLC是硬扛，用超快速液相是順風(fēng)局。

① 大批量質(zhì)控樣品

比如食品中農(nóng)殘篩查、飼料中三聚氰胺、藥品含量均勻度。一天幾十個(gè)樣品，時(shí)間壓下來，效率翻倍。

② 方法開發(fā)與條件篩選

換pH、換有機(jī)相比例、換梯度——超快速液相跑一針七八分鐘，一天能試幾十個(gè)條件。開發(fā)周期從一周縮到一兩天。

③ 不穩(wěn)定的化合物

有些生物樣品、代謝產(chǎn)物放不住，在流動(dòng)相里多待一分鐘就多一分降解。快跑，不是為省時(shí)間，是為拿到真實(shí)結(jié)果。

④ 痕量分析

配合高靈敏度檢測(cè)器（比如熒光、DAD），超快速液相能在不犧牲信噪比的前提下濃縮樣品峰，檢出限反而更低。

表3. 超快速液相 適用場(chǎng)景一覽

五、檢測(cè)器怎么配

超快速液相對(duì)檢測(cè)器有兩個(gè)硬要求：采樣頻率高、基線噪聲低。

依利特系統(tǒng)里這幾款是常見的搭檔：

D3230L 二極管陣列檢測(cè)器

橢球鏡光路，高光通量，0.6nm分辨率。多波長(zhǎng)同時(shí)采，跑一針頂以前跑三針。氣燈快換設(shè)計(jì)，不用關(guān)機(jī)等燈冷。

MFD3100 多波長(zhǎng)熒光檢測(cè)器

LED光源，波長(zhǎng)定位不用校準(zhǔn)。共聚焦光路，靈敏度比常規(guī)熒光高一個(gè)數(shù)量級(jí)。黃曲霉毒素、苯并芘這類痕量物質(zhì)，檢出限做到0.03μg/kg以下。

UV3100 紫外可見檢測(cè)器

波長(zhǎng)精度±0.1nm，0.0001AU級(jí)別的微小吸收變化也能抓得住。側(cè)置檢測(cè)池，換燈、換池不用拆整機(jī)。

一個(gè)建議： 如果你做的是雜質(zhì)譜分析、天然產(chǎn)物篩查這類“不知道有沒有”的樣品，直接上DAD。如果是已知靶標(biāo)物的定量，UV或熒光更穩(wěn)、更省錢。

表4. 依利特 檢測(cè)器搭配推薦表

六、色譜柱怎么選

超快速液相不挑柱子，但柱子挑系統(tǒng)。

硬指標(biāo)： 粒徑3μm以下，柱長(zhǎng)150mm以內(nèi)，內(nèi)徑2.1mm或3.0mm。

推薦這幾款，都是實(shí)打?qū)嵟苓^的：

Supersil 1.8μm系列

超純硅膠，酸性、堿性、中性化合物通吃。水相比例高也不塌峰，適合極性化合物、中藥成分、多肽。

SinoPak BEH雜化硅膠柱

pH 1.0~12.5都能扛。高溫、高水相、高pH清洗——極端條件下不崩柱床，壽命比普通硅膠柱長(zhǎng)一倍。

核殼色譜柱

實(shí)心核+多孔層，傳質(zhì)路徑比全多孔柱短一半。柱壓低，普通HPLC也能用，但放在超快速液相上，線速度拉滿也不掉板效。

一個(gè)提醒： 別把250mm長(zhǎng)柱硬塞進(jìn)超快速液相。柱壓高、分析時(shí)間長(zhǎng)，還容易堵。短柱+小顆粒才是正解。

表5. 超快速液相 色譜柱選型指南

七、說句實(shí)在的

超快速液相不是什么顛覆性技術(shù)，也不是非得花大價(jià)錢換系統(tǒng)才能干活。

它更像一個(gè)工具箱里多出來的那把短柄錘子。

你不是不能敲，是原來的錘子柄太長(zhǎng)，使不上勁。

現(xiàn)在柄短了，力還是那個(gè)力，落點(diǎn)更準(zhǔn)、回彈更快。

如果你的實(shí)驗(yàn)室樣品量在漲、時(shí)間在壓、人手沒變——超快速液相不是升級(jí)，是剛需。

常見的問題(FAQ)

Q1：我現(xiàn)在的HPLC方法，能直接搬到超快速液相上嗎？

A：可以平移，但要換算。

流速按柱內(nèi)徑比例縮放，梯度時(shí)間按柱長(zhǎng)比例壓縮。依利特軟件里自帶方法轉(zhuǎn)換工具，填幾個(gè)數(shù)就自動(dòng)生成新方法。不需要從頭開發(fā)。

Q2：超快速液相必須用亞2μm柱子嗎？

A：不一定。

用3μm、柱長(zhǎng)100mm，壓力通常在200~300bar，普通HPLC也能跑。買超快速液相，不是逼你天天飆高壓，是給你一個(gè)“想快就能快”的底子。

Q3：日常維護(hù)麻煩嗎？

A：比常規(guī)HPLC更省心。

因?yàn)榱魉俑?、沖洗快，緩沖鹽不容易在泵頭析出。密封圈壽命反而更長(zhǎng)。唯一要注意的是：濾片孔徑要匹配亞2μm填料，別用0.5μm的濾片堵0.2μm的柱頭。