在高效液相色譜（HPLC）分析中，自動進(jìn)樣器不僅是連接樣品與色譜柱的“橋梁”，更是實現(xiàn)高通量、高精度、高重復(fù)性實驗的核心組件。它通過自動化的方式完成樣品的引入，極大提升了實驗效率與準(zhǔn)確性，廣泛應(yīng)用于制藥、食品、環(huán)境、化工等領(lǐng)域的定量與定性分析。

一、液相色譜自動進(jìn)樣器的作用

自動進(jìn)樣器主要承擔(dān)以下關(guān)鍵任務(wù)：

精準(zhǔn)進(jìn)樣：將微量樣品（通常為微升級）精確、可重復(fù)地注入色譜系統(tǒng)。

樣品管理：在無人值守下，按預(yù)設(shè)程序連續(xù)處理多個樣品，支持序列分析。

樣品預(yù)處理集成：部分高端型號（如S3200L系列）具備智能稀釋、自動衍生功能，可在進(jìn)樣前完成樣品前處理，實現(xiàn)全流程自動化。

溫控保護(hù)：內(nèi)置溫控裝置（如帕爾貼半導(dǎo)體結(jié)合風(fēng)循環(huán)系統(tǒng)），確保樣品在分析前性質(zhì)穩(wěn)定，尤其對熱敏感或易揮發(fā)樣品至關(guān)重要。

清洗與防污染：通過針內(nèi)、外壁清洗技術(shù)（專利清洗設(shè)計）實現(xiàn)近乎零殘留，避免交叉污染，保障數(shù)據(jù)可靠性。

安全監(jiān)測：配備雙漏液報警等智能監(jiān)控功能，及時預(yù)警，保護(hù)儀器與實驗環(huán)境。

表1.液相色譜自動進(jìn)樣器核心功能及應(yīng)用價值

二、工作原理簡述

自動進(jìn)樣器通?；诰艿臋C(jī)械臂與高精度注射泵協(xié)同工作：

取樣：進(jìn)樣針從樣品瓶（置于樣品盤）中準(zhǔn)確吸取定量樣品。

轉(zhuǎn)移與注入：針頭移動至色譜流路接口（通常為六通閥），將樣品注入定量環(huán)（Loop）。

切換流路：閥切換位置，流動相將定量環(huán)中的樣品“推入”色譜柱開始分離。

清洗與復(fù)位：進(jìn)樣針經(jīng)溶劑清洗后返回待命位置，準(zhǔn)備下一次進(jìn)樣。

先進(jìn)型號如S3100采用8位校準(zhǔn)定位系統(tǒng)，定位精度達(dá)±0.1mm，結(jié)合相對運動設(shè)計，可大幅縮短進(jìn)樣周期（快可達(dá)15秒），顯著提升整體分析效率。

表2.液相色譜自動進(jìn)樣器典型操作流程

三、典型操作流程

開機(jī)準(zhǔn)備：打開儀器與控制軟件，初始化自檢，安裝樣品盤與合適規(guī)格的進(jìn)樣針。

參數(shù)設(shè)置：在軟件中設(shè)置進(jìn)樣體積、清洗次數(shù)、溫度（如4-40℃可調(diào)）、進(jìn)樣模式（如滿環(huán)、部分環(huán)、微量進(jìn)樣等）。

樣品放置：將樣品瓶按順序放入樣品盤，蓋好瓶蓋。

方法編寫：編輯樣品序列，可包括稀釋倍數(shù)、衍生程序等高級操作。

啟動運行：確認(rèn)流動相與色譜柱就緒后啟動序列，儀器自動執(zhí)行取樣、進(jìn)樣、清洗流程。

監(jiān)控與結(jié)束：通過軟件實時監(jiān)控進(jìn)樣狀態(tài)與漏液報警，序列完成后處理數(shù)據(jù)，執(zhí)行關(guān)機(jī)清洗程序。

表3 .液相色譜自動進(jìn)樣器校準(zhǔn)與維護(hù)核心要點

四、校準(zhǔn)與維護(hù)要點

為確保進(jìn)樣精度，定期校準(zhǔn)必不可少：

體積準(zhǔn)確性校準(zhǔn)：使用標(biāo)準(zhǔn)溶液（如咖啡因溶液）進(jìn)行連續(xù)進(jìn)樣，通過峰面積重復(fù)性（RSD通常應(yīng)<1%）評估進(jìn)樣體積的準(zhǔn)確性。

定位精度檢查：運行針位置校準(zhǔn)程序，確保取樣與注入位置準(zhǔn)確無誤。

清洗效果驗證：通過注入空白溶劑檢查殘留峰，確認(rèn)清洗程序有效。

溫度校準(zhǔn)：使用校準(zhǔn)溫度計驗證樣品盤溫度與控制顯示一致性。

日常維護(hù)包括定期更換進(jìn)樣針、清洗針座與密封圈、檢查樣品瓶墊片完整性，并使用合適溶劑沖洗流路以防堵塞。

拓展應(yīng)用：與檢測器聯(lián)用提升檢測能力

自動進(jìn)樣器與高性能檢測器聯(lián)用，可進(jìn)一步拓展HPLC的應(yīng)用范圍。例如，搭配D3270L蒸發(fā)光檢測器（ELSD），即使樣品無紫外吸收基團(tuán)（如碳水化合物、脂類、聚合物等），也能實現(xiàn)高靈敏度檢測。該檢測器在梯度洗脫下基線穩(wěn)定，分辨率好，與自動進(jìn)樣器的無縫配合，使復(fù)雜樣品的全自動分析成為現(xiàn)實，廣泛應(yīng)用于中藥組分、氨基酸、藥物雜質(zhì)等分析場景。

選擇一臺高精度、高可靠性且功能豐富的自動進(jìn)樣器（如S3200L系列的極速進(jìn)樣與精準(zhǔn)溫控，或S3100的超高定位精度與快速周期），不僅能顯著提升液相色譜的分析效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量，更能通過自動化與智能化設(shè)計，減輕操作負(fù)擔(dān)，讓科研與質(zhì)檢人員更專注于結(jié)果解讀與方法開發(fā)。

常見問題解答（Q&A）

Q1：自動進(jìn)樣器進(jìn)樣結(jié)果重復(fù)性差，可能是什么原因？

A1：可能由以下原因?qū)е拢孩?進(jìn)樣針存在氣泡或部分堵塞，需沖洗或更換；② 樣品瓶密封不當(dāng)，揮發(fā)或污染；③ 定量環(huán)中有殘留或未充滿；④ 溫度波動影響樣品穩(wěn)定性。建議執(zhí)行清洗程序、檢查瓶墊、驗證溫度控制，并進(jìn)行系統(tǒng)適應(yīng)性測試。

Q2：如何避免樣品交叉污染？

A2：交叉污染常因清洗不徹底導(dǎo)致。應(yīng)：① 充分利用儀器的內(nèi)外壁清洗功能（如S3200L的專利清洗技術(shù)）；② 優(yōu)化清洗程序，增加清洗溶劑體積與次數(shù)；③ 在高濃度樣品后插入空白溶劑進(jìn)樣；④ 定期更換或清洗進(jìn)樣針及流路組件。

Q3：自動進(jìn)樣器漏液報警頻繁，該如何處理？

A3：首先確認(rèn)報警真實性：① 檢查針座、連接管線及閥接口是否有液體滲出；② 確認(rèn)廢液瓶是否已滿。若為誤報警，可能是傳感器污染或故障，需清潔或檢修。S3200L系列配備雙探頭漏液檢測，可更準(zhǔn)確預(yù)警，但仍需定期維護(hù)流路密封性。